en ENGLISH
eISSN: 2084-9834
ISSN: 0034-6233
Reumatologia/Rheumatology
Bieżący numer Archiwum Artykuły zaakceptowane O czasopiśmie Suplementy Rada naukowa Recenzenci Bazy indeksacyjne Prenumerata Kontakt
Panel Redakcyjny
Zgłaszanie i recenzowanie prac online
NOWOŚĆ
Portal dla reumatologów!
www.ereumatologia.pl
SCImago Journal & Country Rank


6/2009
vol. 47
 
Poleć ten artykuł:
Udostępnij:
streszczenie artykułu:
Artykuł oryginalny

Ocena wiarygodności oznaczania niektórych typów swoistości przeciwciał przeciwjądrowych

Jakub Ząbek
,
Agnieszka Palacz
,
Iwona Horbacz
,
Joanna Pyka

Rematologia 2009; 47,6: 311-318
Data publikacji online: 2010/04/08
Pełna treść artykułu Pobierz cytowanie
 
Zasadniczym problemem w serodiagnostyce autoprzeciwciał są sytuacje, w których przy wysoko dodatnich mianach ANA nie można ustalić swoistości autoprzeciwciał lub, co gorsza, typ „świecenia” ANA częściowo lub kompletnie nie zgadza się ze swoistościami oznaczonymi testami w tych surowicach. Tego typu rozbieżności dotyczą ok. 5–10% surowic.
Wyjaśnienie tego typu sytuacji jest celem niniejszej pracy.
Porównano 4 metody oznaczania przeciwciał anty-dsDNA, uzyskując zaledwie ok. 45% zgodności jakościowej. Analiza „wrażliwości” porównywanych testów ELISA, a także testu ANA-IIF-Hep-2, wykonana testem neutralizacji preparatami dsDNA, ssDNA i RNA, wykazała obniżenie poziomów przeciwciał anty-dsDNA oznaczanych w tych testach do wartości ujemnych. Miareczkowanie dawek anty-genów użytych do neutralizacji nie wykazało różnic w dawce niezbędnej do neutralizacji dla dsDNA i ssDNA i tylko neutralizujące dawki RNA były o rząd wielkości wyższe. Ten niespodziewany wynik spowodował konieczność sprawdzenia swoistości oraz awidności przeciwciał eluowanych metodą affinity. Niezależnie od antygenu, z którego eluowano przeciwciała, wykazywały one reaktywność z pozostałymi antygenami, np. przeciwciała eluowane z NC (związanej z ssDNA) reagowały także z dsDNA i kardiolipiną i były to przeciwciała o niskim indeksie awidności.
Podsumowując, należy stwierdzić, że struktura i stabilność dsDNA (skutkująca obecnością fragmentów jednoniciowych) wyklucza prostą możliwość ustalenia swoistości poszczególnych pól przeciwciał anty-DNA i konieczne jest przy oznaczaniu poziomów przeciwciał dla dsDNA oznaczenie ich powinowactwa/awidności. Rozstrzygnięcie mogłyby przynieść planowane badania na syntetycznych analogach DNA, np. polinukleozydach.

The basic problem in serodiagnostics of autoantibodies concerns situations when at very high ANA titres we cannot estimate the specificity of an autoantibody or, what is even worse, the ANA pattern is partially or totally incompatible with specificities estimated by other immunoenzymatic methods. Solving this problem is the main goal of the presented work. Comparison of four methods of anti-dsDNA assessment gives us only 45% quantitative agreement. Sensitivity of tests used for anti-dsDNA and also ANA-IIF-Hep-2 test, to neutralization by dsDNA, ssDNA and RNA, showed significant lowering of anti-dsDNA antibody levels, up to negativity. Titration of doses of antigens needed for neutralization of used tests showed no differences in neutralizing doses between ds and ssDNA and only neutralizing doses for RNA were 10 times greater.
This unexpected result caused the need to assess specificity and avidity of antibodies eluted by the affinity method. Independently of the antigen used for elution, antibodies showed reactivity with two other antigens, for example: antibodies eluted from ssDNA bound to nitrocellulose also showed reactivity with dsDNA and cardiolipin, and generally they were antibodies of low avidity index.
To summarize, conformation and stability of dsDNA preparations (resulting from presence of denatured DNA fragment in dsDNA molecule) exclude the simple possibility of differentiation of separated antibody pools against DNA and makes (in cases of anti-dsDNA antibody assessment) affinity or avidity estimation necessary. Solving these problems will be possible (as we planned) by using synthetic DNA analogues such as polynucleosides.
słowa kluczowe:

ANA, przeciwciała anty-dsDNA, przeciwciała anty-ssDNA, przeciwciała anty-Cl, awidność i krzyżowa reaktywność przeciwciał anty-DNA




© 2024 Termedia Sp. z o.o.
Developed by Bentus.