eISSN: 1897-4309
ISSN: 1428-2526
Contemporary Oncology/Współczesna Onkologia
Current issue Archive Manuscripts accepted About the journal Supplements Addendum Special Issues Editorial board Reviewers Abstracting and indexing Subscription Contact Instructions for authors Ethical standards and procedures
Editorial System
Submit your Manuscript
SCImago Journal & Country Rank
4/2001
vol. 5
 
Share:
Share:

Signal transduction inhibitors and their use in the cancer treatment, with particular interest to the therapy of acute myeloid leukemia

Andrzej Deptała
,
Daria Nurzyńska

Współcz Onkol (2001) vol. 5, 4 (136-139)
Online publish date: 2003/07/16
Article file
- Zwiazki.pdf  [0.44 MB]
Get citation
 
 
WSTĘP


Zewnątrzkomórkowe sygnały pochodzące ze środowiska, w którym komórki się znajdują, wpływają na podstawowe procesy zachodzące w ich wnętrzu i warunkują ich przetrwanie, proliferację i różnicowanie. Wpływ ten wywierany jest poprzez regulację stężenia i aktywności białek wewnątrzkomórkowych. Zawartość białek w komórkach zależy bezpośrednio od transkrypcji i translacji odpowiednich genów oraz szybkości rozpadu cząsteczek (proteolizy), podczas gdy aktywność białek i możliwość pełnienia przez nie należnych im funkcji zależą od odpowiedniej lokalizacji w komórce i oddziaływań z innymi białkami wewnątrzkomórkowymi. Wszystkie te procesy regulowane są pośrednio przez zewnątrzkomórkowe cytokiny. Obecnie uważa się, że obecność cytokin w środowisku zewnątrzkomórkowym jest niezbędna do przeżycia komórek. W odpowiednim stężeniu cytokiny oddziałujące na swoiste receptory, poza sygnałem do przetrwania komórek, przekazują bodźce do ich wzrostu, podziału i różnicowania (stąd powszechnie nazywane są czynnikami wzrostowymi). Brak czynników wzrostowych równoważny jest z brakiem sygnału do przeżycia i zapoczątkowuje apoptozę, czyli programowaną śmierć komórki [1].



Związanie się zewnątrzkomórkowych cytokin z receptorami błonowymi zapoczątkowuje kaskadę zjawisk polegających na aktywacji lub deaktywacji (najczęściej poprzez przyłączenie lub odłączenie grupy fosforanowej, czyli odpowiednio fosforylację i defosforylację) białek rozpoczynających łańcuch przekaźników wewnątrzkomórkowych. Białka te posiadają aktywność kinaz, dzięki czemu mogą w podobny sposób aktywować białka tworzące kolejne, niższe piętra kaskady. Ostatnim ogniwem łańcucha są znajdujące się w obrębie jądra komórkowego czynniki transkrypcyjne i regulowane przez nie geny, których ekspresja umożliwia proliferację i różnicowanie się komórek oraz powoduje syntezę białek regulujących cykl komórkowy, transport endosomalny i mechanizmy apoptotyczne (ryc. 1.).



Jednymi z najlepiej poznanych białek uczestniczących w przekazywaniu zewnątrzkomórkowych sygnałów do jądra komórkowego i wpływających na aktywację pośredniczących w tym procesie kinaz są białka RAS oraz kinazy C. Poznanie ich funkcji, budowy i znaczenia w procesie onkogenezy stwarza szansę na opracowanie nowych metod farmakoterapii nowotworów. Takich metod wymagają m.in. pacjenci z białaczką szpikową, u których nie udaje się uzyskać remisji całkowitej za pomocą standardowej chemioterapii cytarabiną, lekami z grupy antracyklin (daunorubicyna, idarubicyna, mitoksantron) i hamującymi topoizomerazy (topotekan, etopozyd) lub u których dochodzi do wznowy związanej najczęściej z obecnością blastów opornych na wcześniej stosowane leki. Nadzieję stanowią nowe związki, o odmiennym od tradycyjnych chemioterapeutyków mechanizmie działania, którym poświęcony jest poniższy artykuł.



INHIBITORY TRANSFERAZY FARNEZYLOWEJ


Białka RAS należą do rodziny białek G, czyli niskocząsteczkowych białek wewnątrzkomórkowych posiadających zdolność rozkładania (hydrolizy) wiązania wysokoenergetycznego w cząsteczkach GTP (guanozynotrójfosoforanu). Białka te występują we wszystkich komórkach eukariotycznych i odpowiadają za ich wzrost i różnicowanie pod wpływem zewnątrzkomórkowych cytokin. Przyłączenie się cytokiny do receptora zapoczątkowuje pierwszy etap przekazywania sygnału, czyli aktywację białek, których rola polega na przyłączaniu GTP do cząsteczek RAS (są to białka GRB-2, czyli growth factor receptor-binding protein i GEF – guanine nucleotide exchange factors). W tej konformacji białka RAS mogą aktywować kolejne białka przekaźnikowe o właściwościach kinaz (np. RAF-1, MAPK, ERK, Rac, Rho), których miejscem docelowym działania są czynniki transkrypcyjne znajdujące się na obszarze jądra komórkowego oraz białka regulujące cykl komórkowy, śródkomórkowy transport endosomalny i adhezję komórek. Obok białek aktywujących RAS, obecne są w komórce inne białka (GAP, czyli GTPase accelerator protein i NF1 czyli neurofibromina) przyspieszające hydrolizę GTP i zatrzymujące proces przekazywania sygnału [2].



Białka RAS są produktem jednego z trzech protoonkogenów: H-Ras, K-Ras i N-Ras. Wynikiem translacji są białka H-RAS, N-RAS, K-RAS4A i K-RAS4B zbudowane ze 189 lub 188 aminokwasów, o masie cząsteczkowej 21 kD. Znajdująca się na jednym z końców łańcucha specyficzna sekwencja aminokwasów (określana jako CAAX, gdzie C odpowiada cysteinie, A to aminokwasy alifatyczne, X to metionina lub seryna) jest miejscem potranslacyjnej modyfikacji cząsteczek umożliwiającej im, niezbędną dla funkcjonowania, integrację z wewnętrzną warstwą błony komórkowej [3]. Enzymem biorącym udział w tym procesie jest transferaza farnezylowa, przy udziale której dochodzi do przyłączenia 15-węglowej grupy farnezylowej, koniecznej dla integracji białka z lipidami błony komórkowej (ryc. 2.).



Powstanie cząsteczki białka RAS o odmiennych właściwościach jest wynikiem mutacji punktowej (przeważnie w pozycji 12, 13 i 61), która dotyczy najczęściej protoonkogenu N-Ras, rzadziej K-Ras i tylko sporadycznie H-Ras. W raku gruczołowym trzustki zmutowany protoonkogen Ras stwierdzany jest w 90 proc. przypadków, w raku jelita grubego w 50 proc., w raku płuc w 30 proc. [4]. Mutacje zwiększające ekspresję onkogennych białek RAS u osób z ostrą białaczką szpikową zidentyfikowano po raz pierwszy w 1983 r., a częstość ich występowania oceniono na 30 proc. W większości przypadków mutacje dotyczą N-Ras [14], rzadziej występują w obrębie K-Ras [5]. Zmutowane białka stwierdzano z tą samą częstością w komórkach niezróżnicowanych (M1), jak i zróżnicowanych (M4 i M5). W przypadku pacjentów z ostrą białaczką szpikową, przewlekłą białaczką szpikową i przewlekłą białaczką limfatyczną, u których w klonie komórek białaczkowych nie stwierdzono mutacji w obrębie protoonkogenu Ras, zaobserwowano zwiększoną jego ekspresję. Nadekspresja spowodowana jest w tych przypadkach najprawdopodobniej mutacją w obrębie regionu promotorowego Ras, której skutkiem jest zmienione wiązanie się czynników transkrypcyjnych z promotorowym odcinkiem DNA [6].



Wspomnieć należy, że również w innych chorobach rozrostowych układu krwiotwórczego stwierdzono mutacje, które choć nie dotyczą samych protoonkogenów Ras, powodują nadmierną aktywację białek będących ich produktem. Są to mutacje białek receptorowych lub przekaźnikowych tworzące wcześniejsze ogniwa łańcucha transdukcji sygnałów (takie zmiany stwierdzano w przypadkach przewlekłej białaczki szpikowej [7] i przewlekłej białaczki mielomonocytowej [8]) lub mutacje białek regulujących bezpośrednio aktywność RAS (w przewlekłej białaczce szpikowej typu dziecięcego [9]).



Fakt, że transferaza farnezylowa jest enzymem kluczowym w procesie tworzenia cząsteczek RAS zdolnych do integracji z warstwą wewnętrzną błony komórkowej (która jest jednym z wielu, ale niezbędnym warunkiem działania tych białek), czyni z tego enzymu cel starań mających za zadanie zahamowanie procesu przekazywania, za pośrednictwem wewnątrzkomórkowych kinaz białkowych, sygnałów zapewniających komórkom nowotworowym warunki do przetrwania.



Wśród cząsteczek o właściwościach hamowania transferazy farnezylowej znajdują się związki syntetyczne, jak i naturalne produkty komórek roślinnych i grzybiczych [10]. W badaniach przedklinicznych udowodniono ich właściwości hamowania wzrostu komórek zawierających zmutowane H-RAS i K-RAS w hodowlach in vitro [11, 12] oraz na zwierzęcych modelach białaczki szpikowej, raka płuc i raka trzustki [13, 14].



Pierwszym związkiem poddanym badaniom klinicznym II fazy jest przeznaczony do stosowania doustnego R115777 (pod nazwą tipifornib), heterocykliczny analog związku przeciwgrzybiczego, zawierającego grupę imidazolową. W badaniach przedklinicznych jego stosowanie powodowało u zwierząt odwracalne i zależne od dawki zaburzenia ze strony przewodu pokarmowego, zanik jąder i mielosupresję. W badaniach klinicznych I fazy pacjenci z guzami litymi przyjmowali lek doustnie w różnych dawkach przez różny czas – od 5 dni co 2 tyg. aż do stosowania ciągłego. Towarzyszyły temu niewielkie działania niepożądane w postaci osłabienia, nudności i wymiotów, przemijającej w ciągu doby po odstawieniu leku neuropatii, odwracalnego uszkodzenia nerek oraz neutropenii i małopłytkowości stopnia 3. i 4. [15]. U jednego z pacjentów z przerzutami raka jelita grubego uzyskano zmniejszenie stężenia CEA i brak progresji choroby przez 5 mies.



Po zastosowaniu leku u 34 pacjentów z nawrotową lub oporną na leczenie ostrą białaczką remisja częściowa wystąpiła w 8 przypadkach, a remisja całkowita trwająca ponad 3 mies., w 2 przypadkach. Lek stosowano przez 7 do 21 dni, a w przypadku wystąpienia odpowiedzi na leczenie lub braku progresji choroby powtarzano cykl leczenia po tygodniowej przerwie. Maksymalna tolerowana dawka leku wyniosła 1 200 mg i powodowała zaburzenia ze strony ośrodkowego układu nerwowego. Mniejszym dawkom towarzyszyło podwyższenie stężenia kreatyniny (przy 600 mg 2 razy dziennie), parestezje, polidypsja i krótkotrwała niewydolność nerek (przy 900 mg 2 razy dziennie). Wpływ leku na aktywność transferazy farnezylowej kontrolowano pośrednio, poprzez ocenę zawartości w komórkach farnezylowanej lamininy A. W trwającym obecnie badaniu klinicznym II fazy R115777 podawany jest doustnie pacjentom z oporną na leczenie lub nawrotową ostrą białaczką szpikową w dawce 600 mg 2 razy/dobę przez 21 dni w cyklach 28-dniowych.



INHIBITORY KINAZ BIAŁKOWYCH C


Kinazy białkowe C (PKC) występują niemal we wszystkich komórkach eukariotycznych i odpowiedzialne są za fosforylację szeregu białek wewnątrzkomórkowych. Występują one w komórkach w postaci aktywnej, podobnie jak białka RAS, w połączeniu z warstwą lipidową błony komórkowej [16]. PKC bierze udział w fosforylacji inhibitora czynników transkrypcyjnych z rodziny NF? B/Rel. Powoduje to uwolnienie czynników transkrypcyjnych i umożliwia im wnikanie do jądra komórkowego i aktywację odpowiednich genów [17]. Kinazy białkowe C aktywują także bezpośrednio jedno z białek stanowiących element kaskady białek przekaźnikowych związanych z RAS (ryc. 3.). Zwiększenie degradacji cząsteczek kinazy białkowej C prowadzi do zmniejszenia aktywności kompleksu kinaz białkowych, czego skutkiem jest zahamowanie mechanizmów antyapoptotycznych w komórkach [18].



Zdolność do wiązania się z kinazą białkową C i przyspieszania jej degradacji posiada briostatyna 1, 26-węglowy związek o budowie makrolidowej, będący naturalnym produktem morskiego bezkręgowca Bugula neritina. Obecność w różnych komórkach odmiennych izoform kinazy białkowej C jest najprawdopodobniej przyczyną niejednorodnego wpływu briostatyny na komórki. Poza obniżaniem aktywności PKC i działaniem pro-apoptotycznym, briostatyna in vitro indukuje różnicowanie komórek nowotworowych, zwiększa pośrednio wrażliwość komórek na niektóre cytokiny (zwłaszcza ważne dla układu krwiotworzenia CFU-GM, CFU-E, GM-CSF i G-CSF), a także wywiera efekt przeciwnowotworowy przez działanie immunomodulujące (zwiększa aktywność komórek fagocytujących) [19].



Wpływ briostatyny na apoptozę komórek białaczkowych wykazano w badaniu z zastosowaniem linii ludzkich komórek białaczki szpikowej, które wykazują zmniejszoną wrażliwość na arabinozyd cytozyny (wynikającą ze zwiększonej ekspresji antyapoptotycznego białka BCL-2). Po inkubacji tych komórek (oraz komórek z prawidłową produkcją tego białka) z briostatyną 1, cechy apoptozy po dodaniu ara-C były podobnie nasilone w obydwu liniach komórek, a nawet intensywniejsze w komórkach z nadmiarem białka antyapoptotycznego [20].


W badaniach klinicznych pierwszej fazy podawanie briostatyny 1 w całodobowym wlewie dożylnym przez 8 tyg., związane było z ograniczającym dalsze zwiększanie dawki działaniem niepożądanym w postaci mialgii, dotyczącej przede wszystkim mięśni kończyn dolnych i mięśni ruchowych gałek ocznych. W trakcie stosowania występowała także niewielkiego stopnia trombocytopenia, niedokrwistość i granulocytopenia oraz gorączka i senność. U niemal wszystkich pacjentów występowało obniżenie stężenia hemoglobiny o 1 g/dl i obniżenie hematokrytu w przeciągu tygodnia od podania leku. W badaniu z zastosowaniem znakowanych radioizotopem erytrocytów wykazano, że przyczyną takich zmian była sekwestracja krwinek w wątrobie. Maksymalna tolerowana dawka wynosiła 25 µg/m2 [21].



W związku z obserwowanym w badaniach przedklinicznych synergizmem briostatyny i ara-C w indukowaniu apoptozy ludzkich komórek białaczkowych, rozpoczęto badanie I fazy, w którym pacjenci z oporną na leczenie lub nawrotową ostrą białaczką szpikową lub limfatyczną otrzymywali briostatynę w zwiększanej stopniowo dawce, przed i po terapii z zastosowaniem wysokich dawek ara-C. Wstępna dawka briostatyny wynosiła 12,5 µg/m2 (wlew całodobowy), a po godzinie od zakończenia wlewu podawano ara-C w dawce 1,5 g/m2 co 12 godz. przez 2 kolejne dni. W dniu 8 i 9 powtarzano wlew ara-C, a następnie (dnia 10) wlew briostatyny, w takich samych dawkach jak początkowo. Zwiększanie pierwszej dawki briostatyny ograniczane było przez przedłużającą się granulocytopenię i małopłytkowość oraz przemijającą hiperbilirubinemię. U wszystkich pacjentów uczestniczących w badaniu zaobserwowano zmniejszenie się liczby blastów we krwi obwodowej. Oceniono także wpływ leku na aktywność kinazy C w komórkach białaczkowych – aktywność ta zmniejszała się w niektórych komórkach o 85 proc., pozostając bez zmian w innych. U jednego z pacjentów z chorobą nawrotową uzyskano całkowitą remisję, a u innego, z nawrotem choroby po autologicznym przeszczepieniu komórek macierzystych, nie stwierdzano znamiennej liczby blastów we krwi przez ponad 5 mies., choć wymagał wielokrotnych przetoczeń preparatów krwiopochodnych przez cały ten czas [22]. Badania kliniczne trwają i pozwolą na ocenę działania i ustalenie wskazań optymalnego zastosowania leku w monoterapii lub w kombinacji z innymi chemioterapeutykami.



PODSUMOWANIE


Spośród dotychczas stosowanych metod tylko przeszczepienie szpiku pozwala na uzyskanie remisji u pacjentów z nawrotową białaczką szpikową. Przeszkodę w stosowaniu chemioterapii wysokodawkowej i transplantacji komórek macierzystych stanowi często wiek chorych i brak dawcy zgodnego w układzie HLA. Z drugiej strony, przyczyną niepowodzeń leczniczych w przypadku choroby nawrotowej jest obecność wyselekcjonowanych klonów komórek blastycznych, opornych na dotychczas stosowane chemioterapeutyki. Tym bardziej oczywista jest potrzeba zastosowania leków o odmiennym mechanizmie działania. Możliwość taką stwarzają związki ingerujące w proces przekazywania, za pośrednictwem zewnątrzkomórkowych cytokin, ich receptorów i łańcucha kinaz białkowych, sygnałów regulujących mechanizmy związane z cyklem komórkowym i apoptozą.



Wyniki przeprowadzonych dotychczas i nadal trwających badań klinicznych sugerują, że związki te, a w szczególności inhibitory transferazy farnezylowej i kinaz białkowych C, mogą okazać się skuteczne w leczeniu pacjentów, u których nie udało się uzyskać dotychczas remisji ostrej białaczki szpikowej. W ocenie wyników badań należy pamiętać, że dotyczą one pacjentów poddanych wcześniej wielolekowej chemioterapii, u których mogło dojść do rozwoju poważnych uszkodzeń narządowych oraz selekcji klonów komórek opornych. Nawet mimo tych zastrzeżeń należy oczekiwać wkrótce wprowadzenia do terapii nowych leków, które mogą zmienić rokowanie u pacjentów z ostrą białaczką szpikową.


PIŚMIENNICTWO

1. Jędrzejczak WW. Fizjologiczne i patologiczne znaczenie komunikowania się komórek. Medipress Gastroenterologia 1999; 4 (4): 27-32.

2. Khoshravi-Far R, Der CJ. The Ras signal transduction pathway. Cancer Metastasis Rev 1994; 13: 67-89.

3. Eskens F. Farnesyltransferase inhibitors: current developments and future perspectives. Cancer Treat. Rev 2000; 26: 319-32.

4. Rowinsky EK, Windle JJ, Von Hoff DD. Ras protein farnesyltransferase: a strategic target for anticancer therapeutic development. J Clin Oncol 1999; 17 (11): 3631-52.

5. Coghlan D, Morley AA, Matthews L, Bishop J. The incidence and prognostic significance of mutations in codon 13 of the N-RAS gene in acute myeloid leukemia. Leukemia 1994; 8: 1682-7.

6. Radich J, Kopecky KJ, Willman CL, Weick J, Head D, Appelbaum F, Smith C. N-ras mutations in adult de novo acute myeloid leukemia. prevalence and clinical significance. Blood 1999; 76: 801-7.

7. Faderi S, Talpatz M, Estrov Z, O'Brien S, Kurzrock R, Kantarijan HM. The biology of chronic myeloid leukemia. N Engl J Med 1999; 341: 164-72.

8. Golub T, Barker G, Lovett M, Gilliland D. Fusion of PDGF receptor beta to a novel ets-like gene, tel, in chronic myelomonocytic leukemia with t (5; 12) chromosomal translocation. Cell 1994; 77: 307-16.

9. Bollag G. Loss of NF1 results in activation of the Ras signalling pathway and leads to aberrant growth in haemopoietic cells. Nature Genetics 1996; 12: 144-8.

10. Manne V, Yan N, Carboni JM. Bisubstrate inhibitors of farnesyltransferase. A novel cless of specific inhibitors of ras transformed cells. Oncogene 1995; 10: 1763-79.

11. Kohl NE, Wilson FR, Mosser SD. Protein farnesyltransferase inhibitors block the growth of ras-dependent tumors in nude mice. Proc Nat Acad Sci USA 1994; 91: 9141-5.

12. Mahgoub NM, Taylor BR, Gratiot M, Kohl NE, Gibbs JB, Jacks T, Shannon KM. In vitro and in vivo effects of a farnesyltransferase inhibitor on Nf1-deficient hematopoietic cells. Blood 1999; 94: 2469-76.

13. Kohl NE, Mosser SD, DeSolms SJ. Selective inhibition of ras-dependent transformation by a farnesyltransferase inhibitor. Science 1993; 260: 1934-7.

14. Sun J, QianY, Hamilton AD, Sebti SM. Ras CAAX peptidomimetic FTI 276 selectively blocks tumor growth in nude mice of a human lung carcinoma with K-Ras mutation and p53 deletion. Cancer Res 1995; 55: 4243-7.

15. Zujewski J, Horak ID, Bol C. Phase I and pharmacokinetic study of farnesyltransferase inhibitor R115777 in advanced cancer. Proc Am Soc Clin Oncol 1999; 18: 192 (abstract).

16. Sanz L, Sanchez P, Lallena MJ, Diaz-Meco MT, Moscat J. The interaction of p62 with RIP links the atypical PKCs to NF-kB activation. EMBO J 1999; 18: 3044-3053

17. Hsiou-Chi L, Baltimore D. Regulation of the NF-kB/rel transcription factor and IkB inhibitor system. Curr Opinion Cell Biol 1993; 5: 447-87.

18. Shnaper HW. Signal transduction through protein kinase C. Pediatr Nephrol 2000; 14: 254-8.

19. Frankel AE, Schuster MW, Jurcic JG. Novel therapeutics for chemotherapy-resistant acute myeloid leukemia. BioDrugs 2001; 15 (1): 55-71.

20. Wang S, Vrana JA, Bartimole TM, et al. Agents that down-regulate or inhibit protein kinase C circumverent resistance to 1-b-D-Arabinofuranosylcytosine-induced apoptosis in human leukemia cells that overexpress Bcl-2. Mol Pharmacol 1997; 52: 1000-9.

21. Jayson GC, Crowther D, Prendiville J, et al. A phase I trial of bryostatin 1 in patients with advanced malignancy using a 24-hour infusion. Br J Cancer 1995; 72: 461-8.

22. Grant S, Cragg L, Roberts J, et al. Phase I trial of the PKC activator/downregulator bryostatin 1 (NSC 339555) and high dose ara-C (HIDAC) in patients with refractory acute leukemia. Blood 1999; 94 Suppl. 1: 509a.


ADRES DO KORESPONDENCJI

dr n. med. Andrzej Deptała

Klinika Hematologii i Onkologii

Akademii Medycznej

ul. Banacha 1a

02-097 Warszawa



Wykaz skrótów używanych w artykule:


CEA (carcinoembryonic antigen) – antygen karcyno-embrionalny,


CFU-E (colony forming factor – erythrocytes) – czynnik tworzenia kolonii erytrocytów,


CFU-GM (colony forming factor – granulocytes/macrophages) – czynnik tworzenia kolonii granulocytów i makrofagów,


ERK (extracellular signal-regulated kinases) – kinazy regulowane przez sygnał pozakomórkowy,


FDP – farnezylodwufosforan, GAP (GTPase accelerator protein) – białko przyspieszające działanie hydrolazy guanozynotrójfosforanu,


G-CSF (granulocyte colony stimulating factor) – czynnik pobudzający tworzenie kolonii granulocytów,


GDP – guanozynodwufosforan,


GEF (guanine nucleotide exchange factors) – czynniki biorące udział w wymianie nukleotydów guaninowych,


GM-CSF (granulocyte-macrophage colony stimulating factor) – czynnik pobudzający tworzenie kolonii granulocytów i makrofagów,


GRB (growth factor receptor-binding protein) – białko wiążące się z receptorem dla czynnika wzrostu,


GTP – guanozynotrójfosoforan,


MAPK (mitogen activated kinase) – kinaza aktywowana mitogenem,


MHC (major histocompatibility complex) – główny układ zgodności tkankowej,


NF – neurofibromina,


PKC (protein kinase C) – kinaza proteinowa C.

Copyright: © 2003 Termedia Sp. z o. o. This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International (CC BY-NC-SA 4.0) License (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/), allowing third parties to copy and redistribute the material in any medium or format and to remix, transform, and build upon the material, provided the original work is properly cited and states its license.
Quick links
© 2024 Termedia Sp. z o.o.
Developed by Bentus.