Wpływ tranilastu na ekspresję białka aktywującego fibroblasty α (FAP-α) w fibroblastach prawidłowych oraz fibroblastach keloidowych in vitro

Wprowadzenie. Tranilast (kwas N-(3’,4’-demetoksycynamoilo)-antranilowy) należy do leków przeciwalergicznych. Jego mechanizm działania polega na hamowaniu indukowanego antygenowo wydzielania mediatorów chemicznych z mastocytów i granulocytów zasadochłonnych. Tranilast ma także działanie przeciwfibroproliferacyjne, dlatego stosowany jest w leczeniu blizn przerostowych i keloidów (bliznowców). Keloidy mają związek m.in. z nieprawidłowymi przemianami składników macierzy zewnątrzkomórkowej. Fibroblasty pochodzące z keloidów wykazują nadmierną produkcję kolagenu typu I oraz ograniczony rozkład macierzy zewnątrzkomórkowej w porównaniu z prawidłowymi fibroblastami. Białko aktywujące fibroblasty α (FAP-α może odgrywać ważną rolę w przebudowie macierzy zewnątrzkomórkowej i właściwościach inwazyjnych keloidów.

Cel pracy. Ocena wpływu tranilastu na ekspresję genu FAP-α i jego białka w prawidłowych fibroblastach skóry ludzkiej oraz fibroblastach pochodzących z keloidów hodowanych in vitro.

Materiał i metodyka. W pierwszym etapie badań oceniano wpływ tranilastu na przeżywalność komórek. Drugi etap badań obejmował ocenę ilościową ekspresji mRNA FAP- w fibroblastach prawidłowych oraz fibroblastach keloidowych poddanych działaniu tranilastu. W trzecim etapie badano ekspresję białka aktywującego fibroblasty α w komórkach poddanych działaniu tranilastu.

Wyniki i wnioski. Ekspresja genu FAP-α i białka aktywującego fibroblasty α jest wyższa w fibroblastach keloidowych. Tranilast w stężeniach 3μM i 30 μM nasila ekspresję mRNA FAP- w prawidłowych fibroblastach, jednak nie wpływa na ekspresję w fibroblastach keloidowych. Lek w stężeniach 30 μM i 300 μM wzmaga ekspresję białka aktywującego fibroblasty α w fibroblastach prawidłowych, jednak nie wpływa na fibroblasty keloidowe. Mechanizm działania przeciwfibroproliferacyjnego nie jest związany z wpływem tranilastu na ekspresję FAP-α w fibroblastach pochodzących z keloidów.

Introduction. Tranilast (N-(3’,4’-demethoxycinnamoyl)-anthranilic acid) is an anti-allergic drug. Its mechanism of action is based on the inhibition of antigen-induced release of chemical mediators from mast cells and basophils. It also reveals antifibroproliferative activities. These properties of tranilast are used in the treatment of hypertrophic scars and keloids. Keloids are characterized by incorrect extracellular matrix components turnover. Fibroblasts derived from keloids reveal overproduction of collagen type I and decreased degradation of extracellular matrix in comparison with normal fibroblasts. Fibroblast activation protein α (FAP-α) may play an important role in remodeling of extracellular matrix and the invasive properties of keloids.

Objective. In the present study, the effect of tranilast on expression of FAP-α gene and its protein was evaluated in normal human dermal fibroblasts and fibroblasts derived from keloids cultured in vitro.

Materials and methods. In the first stage of the study, the influence of tranilast on cell viability was estimated. The second stage of the study included the quantitative evaluation of FAP-α mRNA expression in normal and keloid fibroblasts treated with tranilast. The third stage of the study comprised fibroblast activation protein α expression analysis in the examined cells treated with tranilast.

Results and conclusions. The expression of FAP-α gene and fibroblast activation protein α is higher in keloid fibroblasts. Tranilast at concentrations of 3 μM and 30 μM up-regulated mRNA FAP-α expression in normal fibroblasts but did not influence keloid fibroblasts. The drug, at concentrations of 30 μM and 300 μM up-regulated fibroblast activation protein α expression in normal fibroblasts and did not influence keloid fibroblasts. Tranilast antiproliferative effect is not associated with FAP-α expression in keloid fibroblasts.