Wprowadzenie

Tranilast (kwas N-(3',4'-demetoksycynamoilo)-antranilowy) należy do leków przeciwalergicznych. Jego mechanizm działania polega na hamowaniu indukowanego antygenowo uwalniania mediatorów chemicznych przez mastocyty i bazofile. Ma także działanie antyfibroproliferacyjne. Te właściwości tranilastu są wykorzystywane w leczeniu blizn przerostowych i keloidów. Fibroblasty pochodzące z keloidów charakteryzują się nadmiernym wytwarzaniem kolagenu typu I oraz ograniczonym rozkładem macierzy pozakomórkowej w porównaniu z fibroblastami prawidłowymi. Metaloproteinazy odgrywają istotną rolę w przemianach macierzy pozakomórkowej.

Cel pracy

Ilościowa ocena ekspresji genów MMP-2 (żelatynazy A) i MMP-9 (żelatynazy B) w prawidłowych ludzkich fibroblastach skóry oraz fibroblastach pochodzących z keloidów poddanych działaniu tranilastu w warunkach in vitro.

Materiał i metodyka

Materiał eksperymentalny stanowiły dwie linie komórkowe: prawidłowe fibroblasty skóry ludzkiej (NHDF) oraz fibroblasty keloidowe (KEL FIB). W pierwszym etapie oceniano wpływ tranilastu na żywotność komórek. Drugi etap badań obejmował ilościową ocenę ekspresji genów MMP-2 i MMP-9 w ekstraktach RNA z fibroblastów poddanych działaniu tranilastu. Do oceny poziomu transkrypcji genów MMP-2 i MMP-9 w komórkach linii NHDF i KEL FIB po zastosowaniu tranilastu wykorzystano metodę real-time QRT-PCR.

Wyniki

Tranilast w stężeniu 300 μM zmniejsza żywotność fibroblastów obu linii komórkowych. Wykonana analiza wskazuje na stymulujący wpływ tranilastu w stężeniach 3 μM i 30 μM na ekspresję MMP-2 w fibroblastach prawidłowych, a w stężeniu 3 μM w fibroblastach keloidowych. Tranilast nie wpływał natomiast na ekspresję mRNA MMP-9 ani w fibroblastach prawidłowych, ani keloidowych.

Wnioski

Tranilast hamuje przeżywalność fibroblastów prawidłowych i keloidowych oraz wpływa na ekspresję MMP-2. Aktywność leku zależy od zastosowanego stężenia. Konieczne są dalsze badania w celu poznania mechanizmu działania antyproliferacyjnego tranilastu.